1. Выбор правильной клеточной линии
При выборе подходящей клеточной линии для эксперимента учитывайте следующие критерии:
a. Виды: клеточные линии не человека и не приматов обычно имеют меньше ограничений по биобезопасности, но в конце ваш эксперимент определит, следует ли использовать культуру определенного вида.
b.Features: Какова цель вашего эксперимента?Например, клеточные линии, полученные из печени и почек, могут быть более подходящими для тестирования на токсичность.
c. Ограниченная или непрерывная: хотя выбор из ограниченной клеточной линии может предоставить вам больше возможностей для выражения правильной функции, непрерывные клеточные линии, как правило, легче клонировать и поддерживать.
г. Нормальные или трансформированные: трансформированные клеточные линии обычно имеют более высокую скорость роста и более высокую эффективность посева, являются непрерывными и требуют меньшего количества сыворотки в культуральной среде, но их фенотип претерпел необратимые изменения в результате генетической трансформации.
e. Условия и характеристики роста: каковы ваши требования к скорости роста, плотности насыщения, эффективности клонирования и способности роста суспензии?Например, для экспрессии рекомбинантных белков с высоким выходом может потребоваться выбор клеточных линий с высокой скоростью роста и способностью расти в суспензии.
f.Другие критерии: Если вы используете ограниченную клеточную линию, достаточно ли ее запасов?Является ли клеточная линия полностью охарактеризованной, или вам нужно проверить это самостоятельно?Если вы используете аномальную клеточную линию, существует ли эквивалентная нормальная клеточная линия, которую можно использовать в качестве контроля?Является ли клеточная линия стабильной?Если нет, то насколько легко его клонировать и создать достаточное количество замороженных запасов для вашего эксперимента?
2. Получить клеточные линии
Вы можете создать свою собственную культуру из первичных клеток или приобрести готовые клеточные культуры у коммерческих или некоммерческих поставщиков (например, банков клеток).Авторитетные поставщики предоставляют высококачественные клеточные линии, которые были тщательно проверены на целостность и гарантируют, что культура не содержит загрязнителей.Мы рекомендуем не брать культуры из других лабораторий, так как они имеют высокий риск контаминации клеточных культур.Независимо от его источника, убедитесь, что все новые клеточные линии были проверены на наличие микоплазмы, прежде чем вы начнете их использовать.
Время публикации: 01 февраля 2023 г.