В процессе конструирования клеточных линий под случайной интеграцией понимают случайную вставку экзогенных генов в произвольные локусы генома хозяина.Однако случайная интеграция имеет ограничения и недостатки, а целевая интеграция постепенно вытесняет ее благодаря своим преимуществам.В этой статье будет подробно объяснено, почему целевая интеграция заменяет случайную интеграцию, и обсуждена ее важность в построении клеточных линий.
I. Гибкость и точность
Целевая интеграция обеспечивает более высокую гибкость и точность по сравнению со случайной интеграцией.Путем выбора конкретных сайтов интеграции экзогенные гены могут быть точно вставлены в нужные области генома хозяина.Это позволяет избежать ненужных мутаций и вмешательства генов, делая создание клеточных линий более контролируемым и предсказуемым.Напротив, случайная интеграция может привести к неэффективным вставкам, множественным копиям или нестабильным копиям, что ограничивает дальнейшую оптимизацию и модификацию клеточных линий.
II.Безопасность и стабильность
Целенаправленная интеграция обеспечивает более высокую безопасность и стабильность при построении клеточных линий.Путем выбора безопасных участков и других консервативных локусов интеграции можно свести к минимуму потенциальное воздействие на геном хозяина.Следовательно, вставка экзогенных генов не приводит к аномальной экспрессии или генетическим мутациям у хозяина, обеспечивая стабильность и биобезопасность клеточной линии.Напротив, случайная интеграция может вызвать неожиданные генные перестройки, потерю генов или аномальное клеточное поведение, что снижает вероятность успеха и стабильность построения клеточной линии.
III.Управляемость и предсказуемость
Целевая интеграция обеспечивает большую управляемость и предсказуемость.Точно контролируя сайты интеграции и количество экзогенных генов, можно добиться специфических генетических модификаций в клеточных линиях.Это помогает уменьшить нерелевантные вариации и генетическое вмешательство, делая создание клеточных линий более контролируемым, воспроизводимым и масштабируемым.С другой стороны, результаты случайной интеграции нельзя точно контролировать, что приводит к клеточному разнообразию и неопределенности, ограничивая направленную модификацию и развитие специфических функций.
IV.Эффективность и рентабельность
Целенаправленная интеграция демонстрирует более высокую эффективность и экономичность.Поскольку целевая интеграция встраивается непосредственно в нужные локусы, это позволяет избежать трудоемкого и трудоемкого процесса скрининга большого количества клеточных клонов, содержащих целевой ген.Кроме того, целенаправленная интеграция может снизить потребность в выборе факторов давления, таких как антибиотики, тем самым снижая стоимость и время, затрачиваемые на создание клеточной линии.Напротив, случайная интеграция часто требует скрининга большого количества клонов, а скрининг мутаций деградации или инактивации в определенных генах сложнее, что приводит к более низкой эффективности и более высоким затратам.
В заключение, целевая интеграция постепенно заменяет случайную интеграцию в конструировании клеточных линий из-за ее более высокой гибкости, точности, безопасности, стабильности, управляемости, предсказуемости, эффективности и рентабельности.С непрерывным прогрессом и развитием технологий целевая интеграция еще больше расширит свои применения в создании клеточных линий и генной инженерии, предоставляя больше возможностей и возможностей для биотехнологических исследований и промышленного производства.
Время публикации: 26 июня 2023 г.