1.Что такое клеточная культура?
Клеточная культура относится к извлечению клеток из животных или растений и последующему их выращиванию в благоприятной искусственной среде.Клетки могут быть взяты непосредственно из ткани и расщеплены ферментативными или механическими средствами перед культивированием, или они могут быть получены из установленных клеточных линий или клеточных линий.
2.Что такое первичная культура?
Первичная культура относится к стадии культивирования после отделения клеток от ткани и пролиферации в соответствующих условиях до тех пор, пока они не займут все доступные субстраты (то есть не достигнут слияния).На этом этапе клетки необходимо пересеять, перенеся их в новый контейнер со свежей питательной средой, чтобы обеспечить больше места для продолжения роста.
2.1 Линия клеток
После первой пересева первичная культура называется клеточной линией или субклоном.Клеточные линии, полученные из первичных культур, имеют ограниченную продолжительность жизни (т. е. они ограничены; см. ниже), и по мере их прохождения доминируют клетки с наивысшей способностью к росту, что приводит к определенной степени генотипа в популяции, совместимого с фенотипом.
2.2 Клеточный штамм
Если субпопуляция клеточной линии положительно отобрана из культуры путем клонирования или каким-либо другим методом, клеточная линия станет клеточным штаммом.Клеточные штаммы обычно приобретают дополнительные генетические изменения после начала родительской линии.
3. Ограниченные и непрерывные клеточные линии
Нормальные клетки обычно делятся лишь ограниченное число раз, прежде чем теряют способность к пролиферации.Это генетически детерминированное событие называется старением;эти клеточные линии называются конечными клеточными линиями.Однако некоторые клеточные линии становятся бессмертными в результате процесса, называемого трансформацией, который может происходить спонтанно или индуцироваться химическими веществами или вирусами.Когда конечная клеточная линия претерпевает трансформацию и приобретает способность делиться бесконечно, она становится непрерывной клеточной линией.
4. Состояние культуры
Условия культивирования каждого типа клеток очень разные, но искусственная среда для культивирования клеток всегда состоит из подходящего контейнера, который содержит следующее:
4.1 Субстрат или питательная среда, содержащая необходимые питательные вещества (аминокислоты, углеводы, витамины, минералы)
4.2 Факторы роста
4.3 Гормоны
4.4 Газы (O2, CO2)
4.5 Регулируемая физико-химическая среда (рН, осмотическое давление, температура)
Большинство клеток зависят от закрепления и должны культивироваться на твердом или полутвердом субстрате (адгезивная или монослойная культура), в то время как другие клетки могут расти, плавая в среде (суспензионная культура).
5.Криоконсервация
Если в субкультуре есть избыток клеток, их следует обработать соответствующим защитным средством (таким как ДМСО или глицерин) и хранить при температуре ниже -130°С (криоконсервация) до тех пор, пока они не потребуются.Для получения дополнительной информации о субкультуре и криоконсервации клеток.
6.Морфология клеток в культуре
Клетки в культуре можно разделить на три основные категории в зависимости от их формы и внешнего вида (т.е. морфологии).
6.1 Клетки фибробластов биполярны или мультиполярны, имеют удлиненную форму и растут прикрепленными к субстрату.
6.2 Эпителиоподобные клетки имеют полигональную форму, более регулярный размер и прикрепляются к матриксу дискретными листами.
6.3 Лимфобластоподобные клетки имеют сферическую форму и обычно растут во взвешенном состоянии, не прикрепляясь к поверхности.
7. Применение клеточной культуры
Клеточная культура является одним из основных инструментов, используемых в клеточной и молекулярной биологии.Он представляет собой превосходную модельную систему для изучения нормальной физиологии и биохимии клеток (таких как метаболические исследования, старение), воздействия лекарств и токсичных соединений на клетки, а также мутагенеза и канцерогенных эффектов.Он также используется для проверки и разработки лекарств, а также для крупномасштабного производства биологических соединений (таких как вакцины, терапевтические белки).Основным преимуществом использования клеточной культуры для любого из этих приложений является согласованность и воспроизводимость результатов, которые могут быть получены с использованием партии клонированных клеток.
Время публикации: 03 июня 2019 г.